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来源:《常用医药研究动物模型》
1.造模材料 动物:雄性SD大鼠,用体重80~120g;药物:戊巴比妥;器械:制“Q”环形银夹,其直径为0.5mm的银丝,环的内径为0.3mm。
2.造模方法 用3%戊巴比妥,36~42mg/kg腹腔注射,10~15min动物麻醉后,腹部正中纵向切口,依次切开皮肤、正中白色肌腱,用弯剪剪开腹膜,暴露肾脏,一般先做左侧,左肾动脉一般位于肾静脉的后上方,用湿润的无棉枝拨开紧贴的肾静脉,用无齿镊钝性分离动、静脉,右肾动脉平肾门、下腔静脉与肝肾韧带之间逐层向下分离,一般较左肾动脉易分离,用环形银夹钳夹肾动脉的起始部,需确认肾动脉夹置于银夹的环形结构,夹子能够沿动脉滑动,并确认双肾无明显的瘀血、坏死或苍白,对腹膜和肌肉用连续缝合,皮肤用间断缝合。
3.造模原理 由于用银夹狭窄双侧肾动脉,造成双侧肾脏缺血,故其血压升高主要是双侧肾脏持续缺血激活肾素一血管紧张素系统,血管紧张素水平升高不仅直接收缩血管,而且增加交感神经递质的释放及醛固酮和内皮素等活性物质的释放,最终导致高血压形成。
4.造模后的变化 1周后血压为(17.8±2.0)kPa,术后3周血压(21.5±2.5) kPa,术后10周血压为(27.6±3.2)kPa,术后血压>20kPa为高血压大鼠,1个月内高血压的发生率100%。
脑卒中症状的观察:术后第1周、第3周无脑卒中症状,于第9周出现脑卒中症状2例表现为肢体瘫痪、行动迟缓、转圈,头颈扭转,病理检查证实为脑基底节区出血,在出血中心区可见大量红细胞。
5.注意事项 麻醉深度对于模型的制作亦很重要,麻醉过深,术后苏醒较慢,甚至死亡;过浅则易出现出血、腹脏器损伤、拖延手术时间。虽然麻醉剂有一定的合适剂量范围,由于不同批次大鼠体质不同、麻醉剂存放时间不同,产生麻醉的效果也不同。因此在每次大规模实验前均必须摸索适宜的麻醉剂的剂量。
初学模型制作时,术后出血是大鼠死亡最常见的原因。由于肾动、静脉紧贴伴行,因此,钝性分离动静脉之间的筋膜时,需拔开静脉,避免损伤静脉,减少和避免术后出血是模型成功制作的关键,熟练的操作双肾上夹可在5min内完成。另外,熟练的操作可避免由于肾血管的反复牵拉致肾脏长期缺血或瘀血,操作时间过长易引起的感染,这些因素均与术后死亡有关。
术后严格、细致的管理也是模型成功的重要方面。保持饲养房空气流通和适宜的温度最为重要,一般饲养区内温度必须保持在19~29℃。术后死亡多发生于饲养房闷热、气压突然改变或气温突然下降,尤其是南方的气候变化较快,在天气变冷时,使用大功率烤灯,有条件使用暖气保温;变热时加强通风排气、使用空调制冷,调整饲养区内温度、通气等指标至适宜参数,能减少脑卒中及死亡的发生。
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